Repeatability and reproducibility of microscopic examination of adhesive tape strip cytology slides for the quantification of Malassezia spp. in canine skin. Issue 4 (30th May 2022)

• Record Type: Journal Article
• Authors: Tapes, Dimitrios; Skampardonis, Vassilis; Chatzis, Manolis K.; Apostolidis, Kosmas; Athanasiou, Labrini V.; Kasabalis, Dimitris; Kokkinaki, Kassiopi Christina G.; Katsogiannou, Eleni G.; Petanides, Theodoros; Leontides, Leonidas; Saridomichelakis, Manolis N.
• Is Part Of: Veterinary dermatology. Volume 33:Issue 4(2022)
• Page Start: 305
• Page End: e71
• Publication Date: 2022-05-30
• Subjects: cytology -- Malassezia -- repeatability -- reproducibility; Veterinary dermatology -- Periodicals; Pet medicine -- Periodicals; 636.08965
• DOI: 10.1111/vde.13076
• Languages: English
• ISSNs: 0959-4493

Abstract

Abstract: Background: The optimal microscopic magnification and number of optical fields of adhesive tape strip cytological slides that should be examined when searching for Malassezia yeasts on canine skin are unknown. Objectives: To determine the optimal magnification and the minimum number of optical fields that should be examined to maximise intraobserver repeatability and interobserver reproducibility. Materials and Methods: Seven experienced examiners counted, twice, the number of yeasts in 10, 20, 30, 40 and 50 optical fields of 40 slides at ×400 and ×1000 magnification. Results: The number of yeasts per unit surface area was significantly higher at ×1000 compared to ×400 magnification. Repeatability and reproducibility for counting the yeasts was very poor. Conclusions and clinical relevance: Adhesive tape strip cytological slides should be examined microscopically for Malassezia spp. at ×1000 magnification. The repeatability of this examination for counting the yeasts is poor. Abstract : Background – The optimal microscopic magnification and number of optical fields of adhesive tape strip cytological slides that should be examined when searching for Malassezia yeasts on canine skin are unknown. Objectives – To determine the optimal magnification and the minimum number of optical fields that should be examined to maximise intraobserver repeatability and interobserver reproducibility. Conclusions and clinical relevance – Adhesive tape strip cytological slides should be examined microscopically for Malassezia spp at ×1000 magnification. The repeatability of this examination for counting the yeasts is poor. Résumé: Contexte – Le grossissement microscopique optimal et le nombre de champs optiques des lames cytologiques de bandes adhésives à examiner lors de la recherche de levures Malassezia sur la peau de chien sont inconnus. Objectifs – Déterminer le grossissement optimal et le nombre minimal de champs à examiner pour maximiser la répétabilité intra‐observateur et la reproductibilité inter‐observateur. Matériels et méthodes – Sept examinateurs expérimentés ont compté, deux fois, le nombre de levures dans 10, 20, 30, 40 et 50 champs de 40 lames aux grossissements ×400 et ×1 000. Résultats – Le nombre de levures par unité de surface était significativement plus élevé au grossissement ×1 000 par rapport au grossissement ×400. La répétabilité et la reproductibilité du comptage des levures étaient très médiocres. Conclusions et pertinence clinique – Les lames cytologiques de bandes adhésives doivent être examinées au microscope pour Malassezia spp. à un grossissement ×1 000. La répétabilité de cet examen de comptage des levures est faible. Resumen: Introducción ‐ se desconoce el aumento microscópico óptimo y el número de campos ópticos de los portaobjetos citológicos en tiras de cinta adhesiva que deben examinarse al buscar levaduras Malassezia en la piel canina. Objetivos ‐ determinar el aumento óptimo y el número mínimo de campos ópticos que deben examinarse para maximizar la repetibilidad intraobservador y la reproducibilidad interobservador. Materiales y métodos ‐ siete examinadores experimentados contaron dos veces el número de levaduras en campos ópticos de 10, 20, 30, 40 y 50 de 40 portaobjetos con aumentos de x ×400 y ×1000. Resultados ‐ el número de levaduras por unidad de superficie fue significativamente mayor con un aumento de ×1000 en comparación con un aumento de ×400. La repetibilidad y reproducibilidad para contar las levaduras fue muy pobre. Conclusiones y relevancia clínica – Los portaobjetos citológicos en tiras de cinta adhesiva deben examinarse microscópicamente para detectar Malassezia spp . con un aumento de ×1.000. La repetibilidad de este examen para contar las levaduras es pobre. Zusammenfassung: Hintergrund – Die optimale mikroskopische Vergrößerung und die Anzahl der optischen Felder von zytologischen Präparaten mit Klebestreifen, die auf der Suche nach Malassezia Hefen auf Hundehaut untersucht werden sollten, sind nicht bekannt. Ziele – Eine Feststellung der optimalen Vergrößerung und der Mindestanzahl der optischen Felder, die untersucht werden sollten, um die Intra‐Beobachter Reproduzierbarkeit und die Inter‐Beobachter Reproduzierbarkeit maximal zu verbessern. Material und Methoden – Sieben geübte UntersucherInnen zählten zweimal die Anzahl der Hefepilze in 10, 20, 30, 40 und 50 optischen Feldern auf 40 Objektträgern bei einer Vergrößerung von x400 und x1000. Ergebnisse – Die Anzahl der Hefen pro Einheitsoberfläche war bei der x1000 Vergrößerung signifikant höher als bei der x400 Vergrößerung. Die Reproduzierbarkeit und Vergleichbarkeit der Zählungen der Hefen war sehr gering. Schlussfolgerungen und klinische Bedeutung ‐ Zytologische Klebestreifen Präparate sollen mikroskopisch auf Malassezia spp. bei einer x1000 Vergrößerung untersucht werden. Die Wiederholbarkeit dieser Untersuchung ist in Bezug auf die Anzahl der Hefepilze schlecht. 要約: 背景‐ 犬の皮膚に存在するマラセチア酵母を検索する際に、粘着テープ細胞診スライドの最適な顕微鏡倍率と検査すべき光学野の数は不明である。 目的‐本研究の目的は、観察者内再現性および観察者間再現性を最大にするために、最適な顕微鏡倍率と観察すべき最小視野数を決定することであった。 材料と方法 ‐ 経験豊富な7名の検査者が、40枚のスライドをx400およびx1, 000の倍率で10、20、30、40、50視野の酵母数を2回カウントした。 結果‐単位表面積当たりの酵母数は、400倍と比較して1, 000倍で有意に多かった。酵母を数えるための反復性、再現性は非常に悪かった。 結論・臨床的意義‐粘着テープ細胞診スライドは、1, 000倍でマラセチア属菌の顕微鏡検査を行う必要がある。本検査では、酵母の計数の再現性が低かった。 摘要: 背景‐在犬皮肤上寻找马拉色菌酵母菌时, 应检查胶带条细胞学载玻片的最佳显微镜放大倍数和光野数量尚不清楚。 目的‐确定最佳放大倍率和应检查的最小光野数量, 以使观察者内重复性和观察者间重现性最大化。 材料和方法–7名经验丰富的检查者在x×400和x 1, 000放大倍数下, 对40个载玻片的10、20、30、40和50个光学视野中的酵母菌数量进行了两次计数。 结果‐与放大400倍相比, 放大1000倍时单位表面积的酵母菌数量显著更高。计数酵母菌的重复性和重现性极差。 结论和临床相关性–应在显微镜下检查胶带条细胞学载玻片的马拉色菌。放大1000倍。该检查计数酵母菌的重复性较差。 Resumo: Contexto – A ampliação microscópica ideal e o número de campos ópticos das lâminas citológicas de fita adesiva que devem ser examinados nas pesquisas de leveduras do gênero Malassezia em cães são desconhecidos. Objetivos – Determinar a magnificação ideal e o número mínimo de campos ópticos que devem ser examinados para maximizar a repetibilidade intraobservador e a reproducibilidade interobservador. Materiais e métodos – Sete examinadores experientes contaram duas vezes o número de leveduras em 10, 20, 30, 40 e 50 campos ópticos de 40 lâminas nas magnificações de x400 e x1000. Resultados – O número de leveduras por unidade de área de superfície foi significativamente maior em x1000 em comparação com a ampliação de x400. A repetibilidade e a reprodutibilidade para a contagem de leveduras foi muito pobre. Conclusões e relevância clínica – Lâminas de citologia por fica adesiva devem ser examinadas microscopicamente para Malassezia spp a uma magnificação de x1.000. A repetibilidade deste exame para contagem de leveduras foi pobre.